Гамма (GAMMA – GT)

ГАММА (GAMMA – GT)

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD705GT	10 x 15 мл 2 x 15 мл	ГАММА GT - 1 ГАММА GT - 2	2-8°C
AD715GT	5 x 50 мл 1 x 50 мл	ГАММА GT - 1 ГАММА GT - 2	2-8°C

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для количественного определения гамма-глутамилтрансферазы (ГАММА – GT) в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Фермент катализирует реакцию переноса γ-глутамилового остатка глутамиловой кислоты на акцепторный пептид или на L-аминокислоту. γ-GT содержится почти во всех органах человека: печени, почках, поджелудочной железе. Изменение ее активности в сыворотке имеет большое диагностическое значение при заболеваниях гепатобилиарного тракта. Фермент является чувствительным скрининг-тестом для обнаружения скрытой формы алкоголизма.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Данный метод (Szasz) основан на реакции с использованием растворимого субстрата - глутамил карбокси нитроанилида. Скорость образования р-нитроанилида, пропорционально активности γ-GT в образце.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики.
Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить показания анализа.

Цвет и вид компонентов:

Реагент 1: прозрачная бесцветная жидкость

Реагент 2: прозрачная светло-желтая жидкость (имеет тенденцию мутнеть в зависимости от возраста, но этот фактор не влияет на показатели анализа).

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:

Внимание: Данные реагенты содержат азит натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности при использовании:

1. Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
2. Не замораживайте реагенты.
3. Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «Применение».
4. Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
5. Следуйте требованиям по утилизации продукта.

СОСТАВ НАБОРА:

Компонент	Ингридиенты	Концентрация в тестах	Компонент
Реагент 1		tris буфер pH 8.25	100.0 ммоль/л
		Гликольглицин	100.0 ммоль/л
		антикоагулянты	-----
Реагент 2		Карбоксинитроанилид	2.9 ммоль/л
		Антикоагулянты	------

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Монореагентная методика: смешайте 1 часть Реагента 2 с 5 частями Реагента 1.При температуре 2-8°C рабочий реагент стабилен 3 недели.

Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1и 2 готовы для использования.
После вскрытия, при правильном хранении, компоненты остаются стабильными до окончания срока годности (на бирке).

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Рекомендуемый образец - сыворотка или EDTA плазма, свободную от гемолиза. НЕ ИСПОЛЬЗОВАТЬ: цитрат, оксалат фторид и гепарин. В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотка должна быть отделена от клеток сразу же после забора крови. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови немедленно после забора.

Стабильность: до 7 дней при температуре 2-8°C.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	Нет
Универсальные контроли Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	Нет
Универсальные контроли Уровень 2	AD932

Процедура определения:
Длина волны: λ 405 нм

Температура: 25оС (30°C или 37°C)

Кювета с длиной оптического пути: 1 см.

Монореагентная методика:	Бланк	Калибратор	Образец
Рабочий реагент	1000 µл	1000 µл	1000 µл
Образец	----	----	100 µл
Калибратор	----	100 µл	----
Аккуратно перемешайте и инкубируйте 1 мин. при 25°C (30°C/37°C). В течение следующих 3 минут высчитайте среднее значение оптического расстояния в минуту (∆OD/мин).

Факторный расчет:
405нм: U/l = ∆OD/мин x 1158

Биреагентная методика:		Бланк	Калибратор	Образец
Реагент 1		1000 µл	1000 µл	1000 µл
Образец		----	----	100 µл
Калибратор		----	100 µл	----
	Аккуратно смешайте и инкубируйте 2 мин. в термостате при 37°C
Реагент 2	200 µл 200 µл 200 µл
Аккуратно смешайте и выдержите 1 мин. в термостатической кювете при 37°C В течение следующих 4 минут измеряйте изменение абсорбции в минуту (∆OD/мин).

Для расчета активности фермента: 405нм: U/l = ∆OD/мин x 1368
*Вышеуказанные факторы должны быть утверждены используемым общим калибратором (AD973).

Калибровка:

Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор перед использованием:

1. Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
2. Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
3. Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:

Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.

Контроли должны подвергаться анализу:

1. Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
2. Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
3. В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

405нм: U/l = ∆OD/мин x 1368

(Коэффициент пересчета: µKat/l = U/l x 0.0167).

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

	U/l при 37°C5*	μkat/l при 37°C5*
Мужчины	От 8 до 61	От 0.13 до 1.02
Женщины	От 5 до 36	0.08 – 0.6

* Есть коэффициенты пересчета для других температурных показателей. Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность:

Линейность до 1196 U/l. (20 µKat/l).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl (9г/л) и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 600 µмоль/л.

Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 5 г/л.

Липемия: нарушение менее 10% при показателях интралипидов до 5 г/л.

Чувствительность: самый низкий уровень до 1 U/l (0.016 µKat/l).

Точность:

Внутрисерийная N = 20	Среднее значение (U/l)	SD	%CV	Межсерийная N = 20	Среднее значение (U/l)	SD	% CV
Уровень 1	44.4	0.96	2.18	Уровень 1	44.3	1.44	3.26
Уровень 2	194.4	1.35	0.69	Уровень 2	194.3	4.29	2.20

Метод сравнения:

Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов γ-GT (y) и другими доступными реагентами (x), дали следующие результаты.

y = 0.939x + 0.345

r = 0.999

Ранг образца: от 5 до 345 U/l

БИБЛИОГРАФИЯ:

1. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed. 30-54, 370-372 and 984.
2. Szasz G., Clin. Chem., 22 (1976) 2051.
3. Szasz G, Persijin JP, et al. Z Klin Chem Klin Biochem 1974; 12:228.
4. Szasz G. Methods of Enzymatic Analysis. 2nd English ed. New York: Academic Press, Inc. 1974:717.
5. Abicht K et al., Multicenter Evaluation of New Liquid GGT and ALP Reagents with New Reference Standardisation and Determination of Reference Intervals. Clin Chem Lab Med 2001; 39, Special Supplement pp S1-S448, May 201.
6. Zwata B, Klien G, Bablok W. Temperature Conversion in Clinical Enzymology? Klin Lab 1994, 40:33-42.