Холестерин липопротеинов низкой плотности LDL

ХОЛЕСТЕРИН ЛИПОПРОТЕИНОВ НИЗКОЙ ПЛОТНОСТИ (LDL)

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:

Кат. №. Количество Реагент Хранение
AD605LL 2 x 45 мл ХС-ЛПНП - 1 2-8°C
2 x 15 мл ХС-ЛПНП - 2
1 x 1мл ХС-ЛПНП - Калибратор
AD615LL 2 x 90 мл ХС-ЛПНП - 1
2 x 30 мл ХС-ЛПНП - 2
1 x 1мл ХС-ЛПНП - Калибратор

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для определения холестерина липопротеинов низкой плотности в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Общеизвестно, что уровень общего холестерина в крови связывают с ишемической болезнью сердца (ИБС). В последнее время, кроме показателей общего холестерина, начали учитывать показания холестерина липопротеинов низкой плотности для диагностики ИБС. Таким образом, определение ХС-ЛПНП вызывают огромный интерес у специалистов. В настоящее время основной методикой определения ХС-ЛПНП является метод ультрацентрифугирования. Так как этот процесс достаточно трудоемкий, его не применяют для ежедневных исследований. Для повседневных методик пользуются расчетной формулой Фридвальда. Однако, подсчеты ХС-ЛПНП зависят от погрешности и точности измерений трех составляющих: общего холестерина, триглицеридов и холестерина липопротеинов высокой плотности. Для такого гомогенного анализа компания Audit Diagnostics предлагает тест типа “L”, который устраняет подготовительные этапы или расчеты и может использоваться на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

При добавлении к образцу реагента 1, защитный реагент соединяется с ЛПНП и защищает их от реакций ферментов. CHE (холестеролэстераза) и CO (холестеролоксидаза) реагируют с остальными фракциями липопротеинов. Перекись водорода, образованная в ходе реакции энзима с холестерином промежуточной плотности разлагается под действием реагента 1. При добавлении реагента 2, защитный реагент высвобождение ЛПНП из комплекса и при помощи азида натрия активизируется каталаза. В процессе второй реакции CHE и CO реагируют только с ЛПНП. Под действием окислителя с HDAOS и 4-AA в присутствии пероксидазы (POD) перекись водорода образует цветной комплекс. Интенсивность окраски голубого комплекса прямо пропорциональна содержанию ЛПНП в образце. Анализ состоит из двух этапов: удаление хиломикронов и ЛПНП и удаление ХС-ЛПВП при помощи холестеролэстеразы и ферментов оксидазы.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:

Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Прозрачная светло-желтая жидкость
Калибратор: Лиофильный осадок.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
Внимание: придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с реагентами в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

  1. Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
  2. Не замораживайте реагенты.
  3. Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
  4. Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
  5. Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:

Компонент Ингредиенты
Реагент 1 GOOD’S буфер
Холестеролэстераза (CHE)
Холестеролоксидаза (CO)
4-аминоантипирин (4-AA)
Пероксидаза
MgCl2
Детергент
Реагент 2 GOOD’S буфер
Детергент
TODB
Антикоагулянт

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Реагент 1и 2 готовы для использования.
Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.

Калибратор: аккуратно снимите крышку, чтобы не рассыпать лиофильный материал. Перезагрузите калибратор, используя 1мл дистиллированной воды, и дайте ему отстояться 30 минут перед использованием. Калибратор стабилен 7 дней при 2-8 oC или 1 месяц при -20oC с момента перезагрузки. Открытые материалы стабильны до окончания даты пригодности, указанной на этикетке. Компоненты калибратора заказываются отдельно. Перед использованием проверьте, чтобы номер на флаконе совпадал с номером на калибраторе.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку или гепаринизированную плазму. При работе с образцами рекомендуется придерживаться требований NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец должен набираться только в специально предназначенный для этого контейнер. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часа после забора крови. Перед использование, охладите образец при 4oC. Для длительного хранение, образцы необходимо заморозить при
-70oC или ниже.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание Кат. № Описание Кат. №
Холестериновые контроли Уровень 1
Липидные контроли Уровень 1
AD9041
AD9009
Фотометр Нет
Холестериновые контроли Уровень 2
Липидные контроли Уровень 2
AD9051
AD9019
Общее лабораторное оборудование Нет

Процедура определения:
Длина волны: λ 600 нм
Температура: 37°C
Оптический путь: 1 см

Бланк Калибратор Образец
Реагент 1 900 µл 900 µл 900 µл
Образец ---- ---- 10 µл
Калибратор ---- 10 µл ----
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность реагента(OD1) через 5 мин.
Реагент 2 300 µл 300 µл 300 µл
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность реагента(OD2) через 5 мин.

Калибровка:

Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

  1. Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
  2. Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
  3. Контроли качества за пределами допустимой нормы.
Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:
  1. Когда получен предварительный отчет о результатах анализов пациента.
  2. Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
  3. В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Концентрация ХС-ЛПНП = OD образца /OD калибратора x Концентрация калибратора

Коэффициент пересчета: ммоль/л = мг/дл х 0.0259.
*Фотометр обнуляется по бланку.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Классификация NCEP ЛХ НП (мг/дл) Взрослые (мг/дл) Взрослые (ммоль/л) Дети/подростки
(мг/дл)
Дети/подростки
(ммоль/л)
Желательный < 130 <3.36 < 110 < 2.85
Граничный 130 to 160 3.36 – 4.15 110 to 120 2.85 – 3.11
Высокий ≥ 160 >4 15 ≥ 130 >3.37

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 385 мг/дл (10 ммоль/л).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях неконьюгированного билирубина до 50 мг/дл.

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях коньюгированного билирубина до 40 мг/дл.

Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 500 мг/дл.

Аскорбиновая кислота: нарушение менее 10% при показателях аскорбиной кислоты до 50 мг/дл.

Метод сравнения:

Сравнение 20 образцов с использованием этих реагентов ХС-ЛПНП (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 0.9338x + 3.6259 r = 0.9121

БИБЛИОГРАФИЯ:

  1. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Textbook Of Clinical Chemistry 2nd ed., Saunders, Philadelphia, 1994.
  2. Rifai N, Warnick GR. ed. Handbook of Lipoprotein Testing. AACC Press, Washington, DC, USA, 1997.
  3. The Expert Panel. Report of the National Cholesterol Education Program Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults. Arch. Intern. Med. 1988; 148:36-69.
  4. The Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults. Summary of the second Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel II). JAMA.1993; 269:3015-3023.
  5. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed. 30-54, 488-490 and 994.
Контактный телефон: +38 (044) 272-19-23
Адрес: г. Киев, ул. Рейтарская, 18