Холестерин липопротеинов высокой плотности (HDL)

ХОЛЕСТЕРИН ЛИПОПРОТЕИНОВ ВЫСОКОЙ ПЛОТНОСТИ (ХС-ЛПВП)

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА:

Кат. №. Количество Реагент Хранение
AD602HD 2x45 мл ХС-ЛПВП -1 2-8°C
2x15 мл ХС-ЛПВП -1
1X1мл ХС-ЛПВП -Калибратор
AD612HD 2x90 мл ХС-ЛПВП -1 2-8°C
2x30 мл ХС-ЛПВП -1
1X1мл ХС-ЛПВП -Калибратор
AD622HD 4x90 мл ХС-ЛПВП -1 2-8°C
4x30 мл ХС-ЛПВП -1
1X1мл ХС-ЛПВП -Калибратор

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для прямого определения холестерина липопротеинов высокой плотности в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Давно известно, что уровень общего холестерина в крови связывают с ишемической болезнью сердца. В последнее время, кроме показателей общего холестерина, начали учитывать показания холестерина липопротеинов высокой плотности для диагностики ишемической болезни сердца. Была выявлена зависимость между концентрацией ХС-ЛПВП и частотой заболеваемости ишемической болезнью сердца. Селективные методики, такие как гепарин с марганцем, декстран с магнием и фосфоровольфрамовая кислота с магнием, широко используются для определения ХС-ЛПВП.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Полианионы и поверхностно-активное вещество в Реагенте 1 селективно связывают ЛПНП, ОЛПНП и хиломикроны. ХС-ЛПВП реагируют с CHE (холестеролэстераза) и CO (холестеролоксидаза), образуя свободные жирные кислоты и H2O2. 4-AA/HSDA в присутствии POD (пероксидазы) и H2O2 превращается в голубой комплекс. Количество образованного комплекса прямо пропорционально концентрации ХС-ЛПВП в образце.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:

Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Прозрачная светло-желтая жидкость.
Калибратор: Лиофильный осадок.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:

Внимание: придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с реагентами в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

  1. Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
  2. Не замораживайте реагенты.
  3. Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
  4. Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
  5. Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:

Компонент Ингредиенты
Реагент 1 TODB
Аскорбатоксидаза
PVS
PEGME
MgCl2
Буфер (pH 6.5)
Реагент 2 Буфер (pH 6.5)
Холестеролэстераза(CHE)
Холестеролоксидаза(CO)
Пероксидаза (POD)
4-аминоантипирин (AA)

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Реагент 1и 2 готовы для использования.

Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.

Калибратор: аккуратно снимите крышку, чтобы не рассыпать лиофильный материал. Перезагрузите калибратор, используя 1мл дистиллированной воды, и дайте ему отстояться 30 минут перед использованием. Калибратор стабилен 7 дней при 2-8 oC или 1 месяц при -20oC с момента перезагрузки. Открытые материалы стабильны до окончания даты пригодности, указанной на этикетке. Компоненты калибратора заказываются отдельно. Перед использованием проверьте, чтобы номер на флаконе совпадал с номером на калибраторе.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку или гепаринизированную плазму. При работе с образцами рекомендуется придерживаться требований NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец должен набираться только в специально предназначенный для этого контейнер. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часа после забора крови. Рекомендуется измерять ЛХ ВП немедленно после забора крови.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание Кат. № Описание Кат. №
Холестериновые контроли Уровень 1 Липидные контроли Уровень 1 AD9041 AD9009 Фотометр Нет
Холестериновые контроли Уровень 2 Липидные контроли Уровень 2 AD9051 AD9019 Общее лабораторное оборудование Нет
Процедура определения:
Длина волны: λ 600 нм
Температура: 37°C
Оптический путь: 1 см
Бланк Калибратор Образец
Реагент 1 900 µл 900 µл 900 µл
Образец ---- ---- 10 µл
Калибратор ---- 10 µл ----
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность реагента(OD1) через 5 мин.
Реагент 2 300 µл 300 µл 300 µл
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность реагента(OD2) через 5 мин. Калибровка: OD= Образец/калибратор (OD1- OD2) – Реагент (OD1- OD2)
Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:
  1. Используете новый комплект реагентов или меняете номер партии
  2. Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
  3. Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.

Контроли должны подвергаться анализу:

  1. Когда получен предварительный отчет о результатах анализов пациента.
  2. Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
  3. В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Концентрация ХС-ЛПВП = OD образца/OD калибратора x Концентрация калибратора

Коэффициент пересчета: ммоль/л = мг/дл х 0.0259.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Возраст Мужчины (ммоль/л) Женщины (мг/дл) Женщины (ммоль/л) Мужчины (мг/дл)
<60 лет 0.78 – 1.63 30 – 63 0.85 – 2.25 33 – 87
>60 лет 0.78 – 1.94 30 – 75 0.85 – 2.49 33 – 96

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 100 мг/дл (2.58 ммоль/л).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl (9г/л) и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 20 мг/дл.

Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 5 г/л.

Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 800 мг/дл.

Аскорбиновая кислота: нарушение менее 10% при показателях аскорбиновой кислоты до 50 мг/дл.

Глюкоза: нарушение менее 10% при показателях глюкозы до 2400 мг/дл.

Холестерин: нарушение менее 10% при показателях холестерина до 500 мг/дл.

Метод сравнения:

Сравнение 20 образцов с использованием этих реагентов ХС-ЛПВП (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 1.2238x - 7.3922 r = 0.964 Ранг образца: от 20 до 100 мг/дл

БИБЛИОГРАФИЯ:

  1. Rifai N, Warnick GR. ed. Laboratory Measurement of Lipids, Lipoproteins and Apolipoproteins. AACC Press, Washington, DC, USA, 1997.
  2. Recommendation of the second Joint Task Force of European and other Societies on Coronary Prevention. Prevention of coronary heart disease in clinical practise; Eur. Heart J. 1998; 19:1434-1503.
  3. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed. 30-54, 485-487 and 987-988.
Контактный телефон: +38 (044) 272-19-23
Адрес: г. Киев, ул. Рейтарская, 18