Кальций с о-крезофталеином

КАЛЬЦИЙ С О-КРЕЗОФТАЛЕИНОМ

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD102C	3 x 125 мл 1 x 125 мл 1 x 10 мл	КАЛЬЦИЙ -1 КАЛЬЦИЙ -2 КАЛЬЦИЙ - Стандарт	15-25°C
AD112C	10 x 15 мл 1 x 50 мл 1 x 10 мл	КАЛЬЦИЙ -1 КАЛЬЦИЙ -2 КАЛЬЦИЙ - Стандарт	15-25°C
AD122C	3 x 250 мл 1 x 250 мл 1 x 10 мл	КАЛЬЦИЙ -1 КАЛЬЦИЙ -2 КАЛЬЦИЙ - Стандарт	15-25°C

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для определения кальция в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Кальций – основной пятый элемент в организме человека. Наибольшая концентрация кальция в скелете, в меньшем количестве в мягких тканях и внеклеточной жидкости. Содержание кальция в скелете - 99%. Примерно 50% кальция содержится в плазме крови, 40% - протеиновые связи и 10% - комплексные соединения. Ионы кальция влияют на сократительную способность сердца и скелетных мышц, и являются основным фактором в работе нервной системы. Баланс кальция в организме регулируется паратгормоном и кальцитонином. Наиболее распространенной причиной низкого уровня кальция в плазме крови является гипоальбуминанемия. Менее распространенные причины - хроническая почечная недостаточность, магниевая недостаточность, гипопаратиреоидизм, остеомаляция и рахит. Повышенный уровень кальция в сыворотке является, в первую очередь, признаком гипопаратиреоидизма, проявления злокачественной опухали на костных тканях, гематологической злокачественной опухоли, почечной недостаточности и переизбытка витаминов D и A.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

В щелочном растворе о-крезофталеиновый комплексон образует с кальцием комплекс фиолетового цвета, который измеряется фотометрически при λ 546 нм. Взаимодействие с ионами магния усиливается при добавлении 8-гидроксихинолина. Интенсивность цвета комплекса прямо пропорциональна концентрации кальция в образце.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:
Реагент 1: прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: прозрачная желтая жидкость.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
Внимание: Данные реагенты содержат азит натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

• Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
• Не замораживайте реагенты.
• Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
• Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
• Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:
Компонент	Ингредиенты	Концентрация в тестах
Реагент 1	Этаноламиновый буфер	927 моль/л
Реагент 2	Крезофталеин	0.32 ммоль/л
	8-гидроксидкьюнолин	13.6 ммоль/л
Стандарт	Кальций	2.5 ммоль/л l

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на бирке.
Монореагентная методика: смешайте 1 часть Реагента 2 с 3 частями Реагента 1.
При температуре 15-25°C.рабочий реагент стабилен 1день.
Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1и 2 готовы для использования.
После вскрытия, при правильном хранении, компоненты остаются стабильными до окончания срока годности.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку или гепаринизированную плазму. НЕ использовать оксалат, ЭДТА и цитрат.
При работе с образцами рекомендуется придерживаться требований NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец должен набираться только в специально предназначенный для этого контейнер. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови немедленно после забора крови.
Стабильность: до 7 дней при 4°C.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	нет
Универсальные контроли Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	нет
Универсальные контроли Уровень 2	AD932

Процедура определения:
Длина волны: λ 546 нм
Температура: 37оC
Оптический путь: 1 см.

Монореагентная методика	Бланк	Калибратор	Образец
Рабочий реагент	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	----	----	20 μл
Калибратор	----	20 μл	----
Аккуратно перемешайте и инкубируйте 5 мин. при 37°C или 15 мин при 15 - 25°C. Измеряйте изменение оптической плотности (OD).

Биреагентная методика:	Бланк	Калибратор	Образец
Реагент 1	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	----	----	40 μл
Калибратор	----	20 μл	----
Реагент 2	330 μл	330 μл	330 μл
Аккуратно перемешайте и инкубируйте 5 мин. при 37°C или 15 мин при 15 - 25°C. Измеряйте изменение оптической плотности (OD)

Калибровка:

• Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:
• Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
• Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
• Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:

Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:

• Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
• Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
• В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Концентрация кальция = OD образца/OD калибратора x Концентрация калибратора
* Фотометр обнуляется против реагента. (Коэффициент пересчета: мг/дл x 0.25 = моль/л).

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Общий кальций в сыворотке		ммоль/л	мг/длl
	Младенцы (< 24 мес.)	От 2.25 до 2.75	9.02 – 11.0
	Дети (<12 лет)	2.20 до 2.70	8.82 – 10.8
	Взрослые	2.15 до 2.50	8.62 – 10.0

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты кальция всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 4 ммоль/л.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях

Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях

Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 5 г/л.

Чувствительность: 0.03 ммоль/л.

Точность:

Внутрисерийная N = 20	Среднее значение (ммоль/л)	SD	% CV	Межсерийная N = 20	Среднее значение (ммоль/л)	SD	% CV
Уровень 1	26.3	0.470	1.79	Уровень 1	9.47	0.473	4.9
Уровень 2	119.4	2.97	2.49	Уровень 2	41.5	0.985	2.37

Метод сравнения:

Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов кальция (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 0.985x + 0.012

r = 0.988

Ранг образца: от 1.10 до 4.20 ммоль/л

БИБЛИОГРАФИЯ:

1. Burtis CA., Ashwood ER., Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed; 30-54, 797-802 and 968.
2. Connerty HV. Bridges AR. Am J Clin Path 45. 1996; 290-296.