Лактат

ЛАКТАТ

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD1008LT	10 x 18 мл	ЛАКТАТ	2-8°C
AD1018LT	4 x 250 мл	ЛАКТАТ	2-8°C
AD1028LT	6 x 60 мл	ЛАКТАТ	2-8°C

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный реагент применяется для количественного определения лактата в плазме, спинномозговой жидкости или цельной крови на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Анаэробный гликолиз заметно увеличивает лактат крови и приводит к некоторому росту уровней пирувата, особенно при длительном применении. Распространенная причина повышения уровня лактата и пирувата в крови – это аноксия, как результат шока, пневмонии и застойной сердечной недостаточности. Лактоацидоз также может иметь место при почечной недостаточности и лейкемии. Недостаточность тиамина и диабетический кетоацидоз связаны с повышенными уровнями лактата и пирувата. Исследования лактата, по которым оценивают кислотно-щелочной баланс, применяются в диагностике и лечении лактоацидоза (аномально высокая кислотность крови).

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Лактатоксидаза (LOX) расщепляет лактат на пируват и H2O2, которые в присутствии пероксидазы (POD) реагируют с 4-аминоантипирином и фенолом с образованием красного хинонимина. Увеличение оптической плотности в связи с образованием красителя прямо пропорционально концентрации лактата в образце.

ПРЕДУПРЕДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики.

Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов: Прозрачная бледно-розовая жидкость.

Любые существенные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
Внимание: Соблюдайте необходимые меры безопасности, требуемые при обращении с лабораторными реагентами. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности при использовании:

1. Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указана на флаконе.
2. Не замораживайте реагенты.
3. Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
4. Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
5. Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ РЕАГЕНТОВ:

Компонент		Ингредиенты	Концентрация
Реагент 1		Монореагент Буфер TRIS pH 7.5 Лактатоксидаза (LOX) Пероксидаза (POD) 4-аминоантипирин	50.0 ммоль/л 0.2 тыс.ед./л 3 тыс.ед./л 0.4 ммоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Реагент 1 готов к применению.
Неоткрытый реагент остается стабильным до окончания даты пригодности, указанной на этикетке, если хранится при температуре 2-8°C.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте плазму крови, собранной при помощи стандартной венопункции в пробирку с фтор-оксалатом (2.5 мг фторида натрия и 2.0 мг моногидрата оксалата калия /мл крови). Не позже 15 минут после забора пропустите спинномозговую жидкость или цельную кровь через центрифугу.

Стабильность:

Плазма: 2 часа при +20-25°C, 2 дня при 2-8°C
Спинномозг. жидкость: 3 часа при +20-25°C, 24 часа при 2-8°C, 1 месяц при -20°C
Цельная кровь: исследуйте сразу же после забора при +20-25°C,2 часа при 2-8°C, Не рекомендуется хранить при -20°C

Примечание:

1. Уровень лактата увеличивается во время интенсивных физических упражнений. Время, требуемое для возврата к нормальному уровню, зависит от физической формы субъекта. Тридцать минут отдыха обычно достаточно для этих целей.
2. Образцы крови должны быть набраны из вены без застойных явлений. Минимальный гемостаз (менее 30 секунд) не повлияет на уровни лактата. Если это возможно, избегайте использования жгута.
3. Гликолиз образцов крови может быстро увеличить уровни лактата. Клетки расходуются на гликолиз и их быстрое удаление важно для точного анализа лактата. Гепаринизированная плазма допускается, но нужно принять меры предосторожности для замедления гликолиза – хранить цельную кровь на льду и затем отделить плазму от клеток в течение 15 минут после забора.

В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 1 часа после забора. Образец должен подвергнуться анализу как можно скорее, но не позже чем через 4 часа после забора.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	Нет
Контрольный Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	Нет
Контрольный Уровень 2	AD932	Солевой раствор 9 г/л NaCl	Нет

Процедура анализа для плазмы/спинномозговой жидкости:

Длина волны: λ: 546 нм
Температура: +25/ +30/ +37°C
Кювета с длиной оптического пути: 1 см
Установка на нуль: против чистого реагента

	Бланк	Калибратор (Cal)	Образец
Реагент 1	1000 мкл	1000 мкл	1000 мкл
Образец	----	----	10 мкл
Калибратор (Cal)	----	10 мкл	----
Хорошо размешайте и измеряйте оптическую плотность (OD) через 10 минут и сопоставьте с чистым реагентом.

Процедура анализа для цельной крови:депротеинизация

Образец/калибратор 100 мкл
Хлорная кислота 0.33N 200 мкл
Смешайте, центрифугируйте 5 минут при 5000 об/мин.
Надосадочная жидкость должна быть прозрачной.

	Бланк	Калибратор	Образец
Реагент R1	1000 мкл	1000 мкл	1000 мкл
Надосадочная жидкость	----	----	50 мкл
Дист. вода	50 мкл	----	----
Калибратор	----	50 мкл	----
Хорошо размешайте, инкубируйте при температуре +37°C в течение 5 минут. Измеряйте оптическую плотность (OD) образца и стандарта по сравнению с реагентом.

Калибровка:

Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

1. Когда используете новый комплект реагентов или меняете номер партии.
2. Производите профилактическое обслуживание или меняете необходимые детали фотометра.
3. Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.

Контроли должны подвергаться анализу:

1. Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
2. Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
3. В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

	мг/дл	ммоль/л
Плазма
	4.5 – 19.8	0.5 – 2.2
Спинномозговая жидкость
Новорожденные	10 – 60	1.1 – 6.7
Возраст 3-10 дней	10 – 40	1.1 – 4.4
Возраст 10 дней	10 - 25	1.1 – 2.8
Взрослые	10 – 22	1.1 – 2.4
Цельная кровь
Венозная	8.1 – 15.3	0.9 – 1.7

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность:

Диапазон измерения: 2.00 – 140 мг/дл (0.2 – 15.5 ммоль/л).Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl (9 г/л) и еще раз подвергните анализу. Результат умножьте на 2.

Интерферирующие субстанции:

Желтуха: искажение менее 10% при концентрации билирубина до 170 мкмоль/л (10 мг/дл).
Гемолиз: искажение менее 10% при концентрации гемоглобина до 220 мг/дл.
Липемия: искажение менее 10% при концентрации Интралипида до 100 мг/дл.

Чувствительность:
Нижний предел измерения составляет 2.0 мг/дл (0.2 ммоль/л).

Точность:

Внутри-серийная N = 20	Среднее значение (мг/дл)	SD мг/дл	% CV	Меж-серийная N = 20	Среднее значение (мг/дл)	SD мг/дл	% CV
Плазма	1.80	0.051	2.83	Плазма	1.67	0.028	1.68
CS-N	3.35	0.059	1.76	CS-N	3.18	0.045	1.37
CS-P	3.46	0.074	2.14	CS-P	3.39	0.024	0.71

Метод сравнения:

Сравнение этого теста на лактат (y) на анализаторе Hitachi 911 и другими доступными реагентами (x), дали следующую зависимость (мг/дл): y= -0.13+1.040x; r=0.997.

БИБЛИОГРАФИЯ:

1. Bablok W et al. A general regression procedure for method transformation. J Clin Chem Biochem.1988;26:783-790.
2. Barhan D, Trinder P. An improved colour reagent for the determination of blood glucose by the oxidase system. Analyst 97.1972:142.
3. Bergmeyer HU (ed), New York, NY: Academic Press Inc; 1974;1464.
4. Burtis CA, Ashwood ER, eds. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 2nd ed. Philadelphia, PA: W.B. Saunders Co; 1994:976.
5. Gutmann I, Wahlefeld A. Methods of Enzymatic Analysis. 2nd ed.
6. Noll F. Methods of Enzymatic Analysis. 2nd ed. Bergmeyer HU ed.
7. Passing H, Bablok W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J Clin Chem Clin Biochem. 1983;21:709-720.
8. Tietz NW. clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Co; 1995: 382 – 383.
9. Trinder P. Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an native oxygen acceptor. Ann. Clin. Biochem. 1969;6:24.
10. Bergmeyer HU (ed), New York, NY: Academic Press Inc; 1974;1464.
11. Burtis CA, Ashwood ER, eds. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 2nd ed. Philadelphia, PA: W.B. Saunders Co; 1994:976.
12. Gutmann I, Wahlefeld A. Methods of Enzymatic Analysis. 2nd ed.
13. Noll F. Methods of Enzymatic Analysis. 2nd ed. Bergmeyer HU ed.
14. Passing H, Bablok W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J Clin Chem Clin Biochem. 1983;21:709-720.
15. Tietz NW. clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Co; 1995: 382 – 383.
16. Trinder P. Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an native oxygen acceptor. Ann. Clin. Biochem. 1969;6:24.