
- ИФА анализаторы
- Цитологическая системам
- Биохимические анализаторы
- Реагенты
- АСТ (AST IFCC)
- Кальций Арсеназо III
- Кальций с о-крезофталеином
- Креатинкиназа (CK-MB)
- Креатинкиназа (CK-NAC)
- Общий холестерин
- Холинэстераза
- Белок в моче
- Гамма (GAMMA – GT)
- Глюкоза PAP
- Железо (с феррозином)
- Иммуноглобулин G (IgG)
- Лактат
- Лактатдегидрогеназа (LDH (P-L) DGKC
- Лактатдегидрогеназа (LDH L-P)
- Липаза
- Магний (Калмагит)
- Микроальбумин
- Мочевая кислота
- Мочевина
- Общий белок
- Преальбумин
- Прямой и общий билирубин
- Ревматоидный фактор (РФ)
- Триглицериды
- Фосфор
- Холестерин липопротеинов высокой плотности (HDL)
- Холестерин липопротеинов низкой плотности LDL
- Цинк
- Кислая фосфатаза
Лактатдегидрогеназа (LDH (P-L) DGKC
Лактатдегидрогеназа (LDH (P-L) DGKC)
УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ
ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:
Кат. №. | Количество | Реагент | Хранение |
AD739LD | 10 x 15 мл 2 x 15 мл |
ЛДГ DGKC - 1 ЛДГ DGKC - 2 |
2-8°C |
AD749LD | 5 x 50 мл 1 x 50 мл |
ЛДГ DGKC - 1 ЛДГ DGKC - 2 |
2-8°C |
ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:
In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для определения лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в сыворотке, рекомендованного Германским обществом клинической химии (DGKC), на автоматических и полуавтоматических анализаторах.
ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:
Лактатдегидрогеназа (LDH) локализируется в цитоплазме. Наибольшая концентрация ЛДГ в скелетных мышцах, печени, сердце, почках и эритроцитах. Существует как минимум 5 изоэнзимов (изоферментов) состоящих из 4 субъединиц пептидов двух разных типов, обозначенный буквой «М» для скелетной мышцы и «Н» для сердца. Так как LDH не является характерным энзимом ткани, то он усиливает многие состояния организма, например: вирусный гепатит, цирроз и рак печени, сердечные заболевания (инфаркт), опухоль на легких, гемолитические заболевания и заболевания почек.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
Кинетический метод заключается в превращении пирувата в лактат с последующим окислением NADH в NAD+. Значение NAD+ прямо пропорционально значению лактатдегидрогеназы в образце:
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.
Цвет и вид компонентов:
Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Прозрачная, светло-желтая жидкость (имеет тенденцию темнеть в зависимости от возраста пациента, но на показатели анализа не влияет).
Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.
Меры безопасности:
Внимание: Данные реагенты содержат азид натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.
Меры предосторожности при использовании:
- Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
- Не замораживайте реагенты.
- Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
- Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
- Следуйте требованиям по утилизации продукта.
ОБОРУДОВАНИЕ:
Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.
СОСТАВ РЕАГЕНТОВ:
Компоненты | Ингредиенты | Концентрация в пробниках |
Реагент 1 | Фосфатный буфер pH 7.5 Пируват Антикоагулянты |
70 ммоль/л 0.7 ммоль/л ------ |
Реагент 2 | NADH Стабилизаторы и антикоагулянты |
1.1 ммоль/л ------ |
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТА И ЕГО СТАБИЛЬНОСТЬ:
Перед использованием хорошо и аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом. При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.
Монореагентная методика: добавьте 1 часть Реагента 2 к 2.5 частям Реагента 1. Рабочий Реагент стабилен 2 недели при температуре 2-8 °C.
Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1 и 2 готовы для использования.
После вскрытия, при правильном хранении, компоненты остаются стабильными до окончания срока годности.
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):
Как образец используйте сыворотку, свободную от гемолиза. Может быть использована гепаринизированная/ЭДТА плазма. В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотка должна быть отделена от клеток сразу же после забора.
Стабильность: до 4 дней при температуре 2-8°C3.
МЕТОД КОНТРОЛЯ:
Необходимые материалы (отсутствуют в данном наборе)
Описание | Кат.№ | Описание | Кат.№ |
Калибратор | AD983 | Общее лабораторное оборудование | Нет |
Универсальная контрольная сыворотка Уровень 1 |
AD922 | Фотометр | Нет |
Универсальная контрольная сыворотка Уровень 2 | AD932 | Соляной раствор 0.9 г/л NaCl | Нет |
Проведение процедуры:
Длина волны: 340 нм(Hg 334 - 365)
Температура: 30°C (25°C or 37°C)
Оптическая длина: 1 см
Монореагентная методика | Контрольная проба | Калибратор | Образец |
Рабочий реагент | 1000 μл | 1000 μл | 1000 μл |
Образец | ---- | ---- | 20 μл |
Калибратор | ---- | 20 μл | ---- |
Аккуратно смешайте и инкубируйте 1 мин. при 30°C (37°C). В течение следующих 3 минут каждую минуту замеряйте оптическую плотность в минуту (∆OD/мин). Найдите среднее значение. |
Для расчета активности фермента:
340 нм U/l = ∆OD/мин x 8095
334 нм: U/l = ∆OD/мин x 8252
365 нм: U/l = ∆OD/мин x 15000
Биреагентная методика | Контрольная проба | Калибратор | Образец |
Реагент 1 | 1000 μл | 1000 μл | 1000 μл |
Образец | ---- | ---- | 20 μл |
Калибратор | ---- | 20 μл | ---- |
Аккуратно смешайте и инкубируйте 5 мин. при 37°C | |||
Реагент 2 | 240 μл | 240 μл | 240 μл |
Аккуратно смешайте и инкубируйте 1 мин. при 37°C В течение следующих 4 минут каждую минуту замеряйте оптическую плотность в минуту (∆OD/мин). Найдите среднее значение |
Фактор подсчета:
340 нм U/l = ∆OD/мин x 9681
334 нм: U/l = ∆OD/мин x 9869
365 нм: U/l = ∆OD/мин x 17880
*Вышеуказанные факторы должны быть указаны в инструкции к калибратору (AD973).
Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор перед использованием:
- Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
- Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
- Контроли качества за пределами допустимой нормы.
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:
- Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
- Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
- В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.
РАСЧЕТЫ:
Монореагентная методика:
340 нм: U/l = ∆OD/мин x 8095 334 нм: U/l = ∆OD/мин x 8252 365 нм: U/l = ∆OD/мин x 15000
Биреагентная методика:
340 нм: U/l = ∆OD/мин x 9681 334 нм: U/l = ∆OD/мин x 9869 365 нм: U/l = ∆OD/мин x 17880
*Вышеуказанные факторы должны быть указаны в инструкции к калибратору (AD973).
(Коэффициент пересчета: µKat/l = U/l x 0.0167).
ГРАНИЦЫ НОРМЫ:
25°C 30°C 37°C
Сыворотка |
120 – 240 U/l | 161 - 322 U/l | 240 - 480 U/l |
2 – 4 µkat/L | 2.7 – 5.3 µkat/L | 4 – 8 µkat/L |
Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:
Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.
Линейность:
Линейность до 1224U/l (20 µkat/L).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl (9г/л) и еще раз подвергните анализу. Результат увеличится в 2 раза.
Интерференция:
Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 600 µмоль/л.
Гемолиз: нарушение менее 13% при показателях гемоглобина до 1.25 г/л.
Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 5 г/л.
Чувствительность: До 13 U/l (0.2 µkat/L).
Точность:
Внутрисерийная N = 20 | Среднее значение (U/l) | SD | % CV |
Межсерийная N = 20 | Среднее значение (U/l) | SD | % CV |
Уровень 1 | 321 | 4.85 | 1.51 | Уровень 1 | 317 | 8.02 | 2.53 |
Уровень 2 | 513 | 11.70 | 2.28 | Уровень 2 | 483 | 9.93 | 2.06 |
Метод сравнения:
Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов ЛДГ (y) и другими доступными реагентами (x), дали следующие результаты.
y = 0.992x +3.093 | r =0.999 | Диапазон образца: 98 - 1598 U/l |
БИБЛИОГРАФИЯ:
- Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed. 30-54, 362-366 and 993.
- Ann. Biol. Clin. 40 (1982) 123.
- Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes;Pre-analytical Variables. Brochure in: Samples: the patient to the Laboratory. Darmstadt: GIT Verlag, 1996.
