
- ИФА анализаторы
- Цитологическая системам
- Биохимические анализаторы
- Реагенты
- АСТ (AST IFCC)
- Кальций Арсеназо III
- Кальций с о-крезофталеином
- Креатинкиназа (CK-MB)
- Креатинкиназа (CK-NAC)
- Общий холестерин
- Холинэстераза
- Белок в моче
- Гамма (GAMMA – GT)
- Глюкоза PAP
- Железо (с феррозином)
- Иммуноглобулин G (IgG)
- Лактат
- Лактатдегидрогеназа (LDH (P-L) DGKC
- Лактатдегидрогеназа (LDH L-P)
- Липаза
- Магний (Калмагит)
- Микроальбумин
- Мочевая кислота
- Мочевина
- Общий белок
- Преальбумин
- Прямой и общий билирубин
- Ревматоидный фактор (РФ)
- Триглицериды
- Фосфор
- Холестерин липопротеинов высокой плотности (HDL)
- Холестерин липопротеинов низкой плотности LDL
- Цинк
- Кислая фосфатаза
Липаза
ЛИПАЗА
УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ
ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:
Кат. №. | Количество | Реагент | Хранение |
AD537L | 4 x 10 мл | ЛИПАЗА - 1 | 2-8°C |
1 x 8 мл | ЛИПАЗА - 2 |
ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:
In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для количественного определения липазы в сыворотке и плазме человека на автоматических и полуавтоматических анализаторах.
ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:
Липаза – фермент катализирующий расщепление триглицеридов на глицерин и высшее жирные кислоты. Этот энзим в организме человека вырабатывается рядом органов и тканей, что позволяет различать липазу желудочного происхождения, поджелудочной железы, липазу легких и т.д. Наиболее важной с клинической точки зрения является липаза поджелудочной железы. Она играет главную роль в переваривании жиров. Определение активности липазы в крови – наиболее информативный критерий диагностик острого панкреатита. Содержание липазы увеличивается и снижается параллельно повышению и снижению активности α-амилазы, но нормализация ее уровня происходит позже нормализации амилазы. Иногда уровень липазы в крови повышается раньше, чем увеличивается активность амилазы и остается повышенным длительное время. При остром панкреатите активность липазы в крови увеличивается в течение 4-8 часов после острого приступа, достигая максимума через 24 часа, снижение наблюдается через 8-14 дней.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
Метод базируется на гидролизе специфического хромогенного субстрата липазы 1,2-O-дилаурил-рэк-глицеро-3-глютаровая кислота-(6-метил-ресоруфин) эстер, эмульгированного желчными кислотами. Активность энзима определяется взаимодействием желчной кислоты и колипазы. Фактически активность липазы не определяется без колипазы, которая активирует липазу панкреатической железы, не влияя на активность других энзимов в сыворотке крови. Высокое содержание холатов препятствует взаимодействию эстеразы с хромогенами, что приводит к повышению поверхностного отрицательного заряда. Измерение активности панкреатичекой липазы базируется на кинетическом колометрическом методе. Серия реакций, используемая в данном методе, является прямым энзиматическим прямым определением липазы. Уровень образования метилресоруфина, измеряется фотометрически, и пропорционален активности липазы в образце.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.
Цвет и вид компонентов:
Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Мутная оранжевая микро-эмульсия. Если Реагент 2 стал красного цвета, он не пригоден для использования.
Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.
Меры безопасности:
Внимание: придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с реагетами в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.
Меры предосторожности при использовании:
- Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
- Не замораживайте реагенты.
- Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
- Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
- Следуйте требованиям по утилизации продукта.
СОСТАВ НАБОРА:
Компонент | Ингридиенты | Ингредиенты | Концентрация |
Реагент 1 | TRIS Буфер pH 8.3 | 40 ммоль/л | |
Колипаза | ≥ 1 мг/л | ||
Дезоксихолат | 1.8 ммоль/л | ||
Тауродезоксихолат | 7.2 ммоль/л | ||
Реагент 2 | Тартрат pH 4.0 | 15 ммоль/л | |
Субстрат липазы | ≥ 0.7 ммоль/л | ||
Хлорид кальция | 0.1 ммоль/л |
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:
Реагент 1 и 2 готовы для использования. Стабильность после вскрытия 90 дней при 2-8°C с плотной закрытой крышкой.
Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):
Как образец используйте сыворотку или гепарин-плазму.14 НЕ ИСПОЛЬЗОВАТЬ: ЭДТА, цитрат и флюорид. В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца.
Стабильность: до 2 дней при 2-8°C.
МЕТОД КОНТРОЛЯ:
Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):
Описание | Кат. № | Описание | Кат. № |
Калибратор | AD983 | Спектрофотометр или фотоколориметр (с λ=580 нм) | нет |
Универсальный контроль Уровень 1 |
AD922 | ||
Универсальный контроль Уровень 2 |
AD932 |
Процедура определения:
Длина волны: λ 578 нм
Температура: 37°C
Оптический путь: 1 см
Бланк | Калибратор | Образец | |||
Реагнет 1 | 1000 µл | 1000 µл | 1000 µл | ||
Образец | ---- | ---- | 10 µл | ||
Калибратор | ---- | 10 µл | ---- | ||
Аккуратно перемешайте и инкубируйте 3 мин. 37°C. | |||||
Реагент 2 | 200 µл 200 µл 200 µл | ||||
Аккуратно перемешайте и инкубируйте при 37°C. Измеряйте оптическую плотность (OD) через 2мин. по бланку. Считайте ∆ Аbs против калибратора, бланка и образца в мин. |
Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор перед использованием:
- Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
- Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
- Контроли качества за пределами допустимой нормы.
Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:
- Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
- Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
- В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.
РАСЧЕТЫ:
Концентрация липазы = ∆ Аbs образца / ∆ Аbs калибратора x концентрация калибратора
(Коэффициент пересчета: µkat/l = U/l х 0.017).
ГРАНИЦЫ НОРМЫ:
U/l | µkat/l | |
Взрослые | 5.6-51.3 | 0.51-3.57 |
Эти значения должны использоваться как базовые. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:
Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.
Линейность: до 250 U/l.
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:10 с 0.9% NaCl (9г/л) и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 10 раз.
Интерференция:
Желтуха: отсутствует при показателях билирубина до 20 мг/дл.
Гемолиз: отсутствует при показателях гемоглобина до 150 мг/дл.
Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 300 мг/дл.
Чувствительность: нижний предел обнаружения 5 U/l.
Точность:
Внутрисерийная N = 21 |
Среднее значение (U/l) | SD | %CV | Межсерийная N = 11 |
Среднее значение (U/l) | SD | % CV |
Уровень 1 | 119 | 4.13 | 3.34 | Уровень 1 | 119 | 5.43 | 4.54 |
Уровень 2 | 215 | 5.97 | 2.78 | Уровень 2 | 215 | 10.7 | 5.02 |
Метод сравнения:
Сравнение 100 образцов с использованием этих реагентов липазы (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.
y = 0.50054x + 3.9443 | r = 0.997 |
БИБЛИОГРАФИЯ:
- Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag, 1995.
- Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik fur die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag, 1991:354-361.
- Kazmierczak S, Catrou P, Van Lente F. diagnostic accuracy of pancreatic enz. evaluated by use of multivariate data analysis. Clin. Chem. 1993; 39:1960-1965.
- Steinberg WM, Goldstein SS, Davies ND et al. Diagnostic assays in acute pancreatitis [Review]. Ann Intern Med 1985; 102:576-580.
- Panteghini M et al. Diagnostic value of four assays for lipase determination in serum: A comparative reevaluation. Clin Biochem 1991; 24:497-503.
- Tietz NW et al. Lipase in serum – the elusive enzyme: An overview. Clin Chem 1993; 39:746-756.
- Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, Pa: WB Saunders, 1995:865.
- Neumann U et al. New substrates for the optical determination of lipase. EP 207252 (1987).
- Bordstrom B. The action of bile salts and other deter. on pancreatic lipase and the interaction with colipase. Biochimica et Biophysica Acta 1977; 488:381-391.
- Gargouri Y, Julien R, Bois A et al. Studies on the detergent inhibition of pancreatic lipase activity. J of Lipid Research 1983; 24:1336-1342.
- Leybold A, Junge W. Importance of colipase for the measurement of serum lipase activity. Adv Clin Enzymol 1986; 4:60-67.
- Guder W, Fonseca-Wollheim W, Heil O et al. Maximun permissible transport and storage times for analysis of blood (serum, plasma), urine and cerebrospinal fluid. DG Klinische Chemische Mitteilungen 1995; 26:207-224.
- Junge W, Abicht K, Goldman J et al. Evaluation of the Colorimetric Liquid Assay for Pancraetic Lipase on Hitachi Analysers in 7 Clinical Centres in Europe, Japan and USA. Clin Chem Lab Med 1999; 37, Special Suppl: 469.
- McNeely M. Lipase. Kaplan A et al. Clin. Chem The C.V Mosby Co. St Louis Toronto. Princeton 1984; 1130-1134, 892.
