Мочевая кислота

МОЧЕВАЯ КИСЛОТА

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD803UA	10 x 15 мл 2 x 15 мл 1 x 10 мл	МОЧЕВАЯ КИСЛОТА - 1 МОЧЕВАЯ КИСЛОТА – 2 МОЧЕВАЯ КИСЛОТА - Стандарт	2-8°C
AD813UA	5 x 50 мл 1 x 50 мл 1 x 10 мл	МОЧЕВАЯ КИСЛОТА - 1 МОЧЕВАЯ КИСЛОТА – 2 МОЧЕВАЯ КИСЛОТА - Стандарт	2-8°C
AD823UA	4 x 200 мл 1 x 160 мл 1 x 10 мл	МОЧЕВАЯ КИСЛОТА - 1 МОЧЕВАЯ КИСЛОТА – 2 МОЧЕВАЯ КИСЛОТА - Стандарт	2-8°C

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

InVitro диагностике данный реагент применяется для определения мочевой кислоты в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах. ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ: 1 Мочевая кислота – это конечный продукт пуринового обмена. Суточная интенсивность синтеза мочевой кислоты составляет примерно 400 мг и диетических ресурсов еще 300 мг. Примерно 75% мочевой кислоты выделяется почками, оставшиеся 25% - выделяются в кишечник, где превращаются в аллантоин при помощи ферментов. Определение мочевой кислоты используют для диагностики и лечения различных почечных и метаболических расстройств, включая почечную недостаточность, подагру, лейкемию, псориаз и лечение цитотостатиками.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Принцип базируется на двойной реакции ферментов уриказы и пероксидазы (POD) и аскорбатоксидазы, которая входит в состав Реагента 1, чтобы минимизировать интерференцию аскорбиновой кислоты. Интенсивность получившегося красного цвета раствора пропорциональна концентрации мочевой кислоты в моче:

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:
Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Прозрачная светло-желтая жидкость.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
Внимание: Данные реагенты содержат азид натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности при использовании:

1. Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
2. Не замораживайте реагенты.
3. Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ»
4. Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
5. Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ РЕАГЕНТОВ:

Компонент	Ингредиенты	Концентрация
Реагент 1	Фосфатный буфер рН 7.5	150 ммоль/л
	Дихлорофенол сульфонат	1.97 ммоль/л
	Аскорбатоксидаза	2000 ед/л
	Ферроцианид калия	0.024 ммоль/л
	Антикоагулянты, стабилизаторы, детергенты	----
Реагент 2	Фосфатный буфер рН 7.5	150 ммоль/л
	4-аминофеназон	1.5 ммоль/л
	Пероксидаза	5000 ед/л
	Уриказа	1000 ед/л
	Антикоагулянты, стабилизаторы, детергенты	----
Стандарт	Мочевая кислота	6 мг/дл

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом. При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на бирке.

Монореагентная методика: смешайте 1 часть Реагента 2 с 5 частями Реагента 1.
При температуре 2-8°C рабочий реагент стабилен 4 недели.

Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1и 2 готовы для использования.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте безлипидную, свободную от гемолиза сыворотку или гепаринизированную/ЭДТА плазму. При работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотка должна быть отделена от клеток сразу же после забора. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часов после забора.

Стабильность3: до 5 при 4°C.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	Нет
Универсальные контроли Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	Нет
Универсальные контроли Уровень 2	AD932	Соляной раствор 0.9% г/л NaCl	Нет

Процедура определения:

Длина волны: λ 510 нм (492 - 550) нм
Температура: 25/30/37°C
Оптический путь: 1 см

	Бланк	Калибратор	Образец
Рабочий Реагент	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	----	----	20 μл
Калибратор	----	20 μл	----
Аккуратно смешайте и инкубируйте при 37°C 5 мин. или 15 мин. при 15-25°C Измеряйте значение оптической плотности (OD).

	Бланк	Калибратор	Образец
Реагент 1	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	----	----	20 μл
Калибратор	----	20 μл	----
Реагент 2	200 μл	200 μл	200 μл
Аккуратно смешайте и инкубируйте при 37°C 5 мин. или 15 мин. при 15-25°C Измеряйте значение оптической плотности (OD).

Калибровка:

Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

1. Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
2. Производите профилактическое обслуживание или меняете необходимые детали фотометра.
3. Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:

1. Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
2. Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
3. В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Концентрация мочевой кислоты = ODобразца /OD_калибратора х концентрацию калибратора.

(Коэффициент пересчета: ммоль/л = 59.5 x мг/дл).

*Фотометр должен быть обнулен по бланку.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений.

Содержание мочевой кислоты в сывортке	µмоль/л	мг/дл
Дети	120 - 320	2.02 – 5.38
Мужчины	210 - 420	3.53 – 7.06
Женщины	150 - 350	2.52 – 5.88

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты мочевой кислоты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 1160 µмоль/л.
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 600 µмоль/л.
Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 1.25 г/л.
Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 1.25 г/л.

Чувствительность: самая низкая при 0.7 µмоль/л.

Точность:

Внутрисерийная N = 20	Среднее значение (µмоль/л)	SD	% CV	Межсерийная N = 20	Среднее значение (µмоль/л)	SD	% CV
Уровень 1	269	5.37	2.00	Уровень 1	275	8.19	2.98
Уровень 2	648	11.86	1.83	Уровень 2	637	8.83	1.38

Метод сравнения:

Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов мочевой кислоты(y) и другими доступными реагентами (x), дали следующие результаты.

y =1.002x + 7.087

r = 0.999

Ранг образца: от 153 до 904 µмоль/л

БИБЛИОГРАФИЯ:

1. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed. 30-54, 422-426 and 1015. &
2. Thelfeld, W. et al (1973) Dtsh. Med. Wschr., 98:380.
3. Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory test, 3rd ed. Philadelphia, Pa: Saunders; 1995; 624-626.