Мочевина

МОЧЕВИНА U,V

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD802U	10 x 15 мл	Мочевина УФ - 1	2-8°C
	2 x 15 мл	Мочевина УФ - 2
	1 x 10 мл	Мочевина УФ - Стандарт
AD812U	5 x 50 мл	Мочевина УФ - 1	2-8°C
	1 x 50 мл	Мочевина УФ - 2
	1 x 10 мл	Мочевина УФ - Стандарт
	4 x 200 мл	Мочевина УФ - 1
AD822U	1 x 160 мл	Мочевина УФ - 2	2-8°C 2-8°C
	1 x 10 мл	Мочевина УФ - Стандарт

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для количественного определения мочевины в сыворотке и плазме человека на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Мочевина – это основной продукт белкового обмена. Более 75% выделяемого небелкового азота составляет белковый азот, содержащий продукты обмена белкового катаболизма в организме человека. Чтобы дифференцировать пре- и постренальную уремию, мочевину обычно определяют в комплексе с креатинином. Преренальная уремия наблюдается при сердечной недостаточности, обезвоживании и повышении белкового катаболизма. Постренальная уремия наблюдается при клубочковом нефрите, поликистозе почек и нефросклерозе.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Уреаза катализирует гидролиз мочевины, при этом образуется аммоний и окись углерода. При взаимодействии аммония с α-кетоглутаратом и NADН в присутствии глутамат дегидрогеназы (GLDH) образуется окисленный NAD и вода. Скорость уменьшения концентрации NADH прямо пропорциональна концентрации мочевины в образце.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:
Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Прозрачная светло-желтая жидкость.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
Внимание: придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с реагетами в лаборатории – реагент содержит азид натрия.
Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности при использовании:

• Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
• Не замораживайте реагенты.
• Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
• Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
• Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:

Компонент	Ингридиенты	Ингредиенты	Концентрация
Реагент 1		TRIS буфер pH 7.95	112 ммоль/л
		α-Кетоглутарат	15.5 ммоль/л
		AДФ	0.94 ммоль/л
		Уреаза	17000 ед/л
		Глутаматдегидрогеназа	60 ед/л
		Стабилизаторы и антикоагулянты	------
Реагент 2		α-Кетоглутарат	115 ммоль/л
		НАДН (NADH)	1.44 ммоль/л
		Стабилизаторы и антикоагулянты
Стандарт		Мочевина	8.35 ммоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТА И ЕГО СТАБИЛЬНОСТЬ:

Перед использованием хорошо перемешайте каждый реагент. При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.

Монореагентная методика: добавьте 1 часть Реагента 2 к 5 частям Реагента 1. Рабочий Реагент стабилен 4недели при температуре 2-8 °C.
Биреагентная методика: жидкие Реагенты 1 и 2 готовы для использования.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку, гепаринизированную или ЭДТА плазму. Соберите мочу, используя антикоагулянты. В работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца.

• Сыворотка/плазма должна быть отделена от клеток в течение 2 часов после забора крови.

Стабильность 4: до 7 дней при температуре 4°C.

• Мочу разведите 1:20 с дистиллированной водой. Результат увеличить в соответствии с фактором разведения.

Стабильность 4: до 7 дней при температуре 4°C.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	Нет
Универсальные контроли Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	Нет
Универсальные контроли Уровень 2	AD932	Соляной раствор 0.9 г/л	Нет

Процедура определения:
Длина волны: λ 340 нм
Температура: 25/30/37°C
Оптический путь: 1 см

	Бланк	Стандарт	Образец
Рабочий реагент	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	----	----	10 μл
Стандарт	----	10 μл	----
Аккуратно перемешайте. Измеряйте разницу оптической плотности(∆OD/мин) от 40 до 300 сек.

	Бланк	Калибратор	Образец
Реагент 1	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	----	----	20 μл
Калибратор	----	20 μл	----
Реагент 2	200 μл	200 μл	200 μл
Аккуратно перемешайте. Измеряйте разницу оптической плотности(∆OD/мин) от 40 до 300 сек.

Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор перед использованием:

• Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
• Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
• Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:

• Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
• Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
• В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Концентрация мочевины = ∆OD образца/∆OD калибратора x Концентрация калибратора

*Фотометр обнуляется против реагнета.

• Коэффициент пересчета для показателей азота мочевины крови: ммоль/л = мг/дл х 0.357.

• Коэффициент пересчета для показателей мочевины крови: ммоль/л = мг/дл х 0.166.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Мочевина	ммоль/л	мг/дл
Сыворотка/плазма2	1.7 - 8.3	10.2 - 49.7
Утренняя моча5	141 - 494	844 - 2958
Суточная моча6	170 - 580	1017 - 3473
Азот мочевины	мг/дл	ммоль/л
Сыворотка/плазма взрослых	6 - 20	17 - 56
Младенцы < 1 года	4 -19	11 - 53
Младенцы/дети	5 -18	14 - 50
Суточная моча	800 - 1666*	2241 - 4667

*Средний объем суточной мочи 1.2 - 1.5 л/24ч.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 51.8 ммоль/л (312 мг/дл).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl. Результат соответственно увеличится в 2 раза.

Интерференция:

Желтуха: нарушение менее 10% при показателях билирубина (и фракций) до 600 µмоль/л.
Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 5 г/л.
Липемия: нарушение менее 10% при показателях триглицеридов до 5 г/л.

Чувствительность: самый низкий уровень обнаружения от 0.18 ммоль/л (1.08 мг/дл).

Точность:

Внутрисерийная N = 20	Среднее значение (ммоль/л)	SD	%CV	Межсерийная N = 20	Среднее значение (ммоль/л)	SD	% CV
Уровень 1	6.62	0.18	2.64	Уровень 1	6.77	0.18	2.71
Уровень 2	27.01	0.65	2.42	Уровень 2	26.10	0.45	1.72

Метод сравнения:

Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов мочевины (y) и другими доступными реагентами (x), дают следующие результаты.

y = 0.945x + 0.437

r = 0.999

Ранг образца: от 2.8 до 48.9 ммоль/л

БИБЛИОГРАФИЯ:

1. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed. 30-54, 415-417 and 1015.
2. McKay EM and McKay LL (1927) J. Clin. Invest. 4.295.
3. Talke H. Shubert, Klin Wchersehr, (1965) 43. 174.
4. Gruder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Pre-analtical Variables. Brochure in: Samples: the Patient to the Laboratory. Darmstadt: GIT Verlag, 1996.
5. Kreig M et al. J Clin Chem Clin Biochem 1986; 24:863.
6. Colombo J-P (ed.). Klinisch-chemische Urindiagnostik. Rotkreuz: LABOLIFE-Verlagsgesellschaft, 1994:180.