Прямой и общий билирубин

ПРЯМОЙ И ОБЩИЙ БИЛИРУБИН

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD275BR	5 x 120 мл	Общий билирубин - 1	2-8°C
	1 x 20 мл	Общий билирубин - 2
AD285BR	5 x 120 мл	Прямой билирубин - 1	2-8°C
	1 x 20 мл	Прямой билирубин - 2
AD295BR	2 X 500 мл	Общий билирубин - 1	2-8°C
	2 x 500 мл	Прямой билирубин - 1
	2 x 35 мл	Общий и Прямой билирубин - 2

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

In Vitro диагностике данный набор реагентов используется для определения прямого и общего в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Прямой билирубин состоит из 2 изомеров: моно- и диглюкуронида. Соединение с глюкуроновой кислотой происходит внутри гепатоцитов. Связанный билирубин – впоследствии выделяется в желчь. Исследования прямого билирубина используют для диагностирования пред печеночной, пост печеночной и негемолитической желтухи Повышенный уровень билирубина – явный признак гепатита, холестаза или карциномы печени, желчекаменной болезни. Общий билирубин (или сывороточный билирубин) существует в 4 различных изомерах. Неконъюгированная α, моноконьюгированная β, диконьюгированная γ и ковалентно связанный альбумин δ. Билирубин - это расщепленный гемоглобин. Он накапливается в желчи, моче, печени и трансформируется в печени. Измерения билирубина ведется для диагностики печеночных заболеваний и гемолитической анемии.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Сульфаниловая кислота реагирует с нитритом натрия, образуя диазотированую сульфаниловую кислоту. В присутствии диметилсульфоксида общий билирубин реагирует с диазотированой сульфаниловой кислотой, образуя азобилирубин. В отсутствие диметилсульфоксида только прямой билирубин реагирует и дает азобилирубин.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:

Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:(для обоих билирубинов)

Реагент 1: Прозрачная бесцветная жидкость.
Реагент 2: Бледно-желтая жидкость.

Меры безопасности:

Внимание: Данные реагенты содержат азид натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности:

1. Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
2. Не замораживайте реагенты.
3. Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ».
4. Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
5. Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ НАБОРА:
Компонент	Ингредиенты	Концентрация в тестах
Общий билирубин
Реагент 1	Сульфаниловая кислота	32.2 ммоль/л
	Соляная кислота	165 ммоль/л
	диметилсульфоксид	7 ммоль/л
Реагент 2	Нитрит натрия	29 ммоль/л
Прямой билирубин
Реагент 1	Сульфаниловая кислота	32.2 ммоль/л
	Соляная кислота	165 ммоль/л
Реагент 2	Нитрит натрия	29 ммоль/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:

Реагент 1 и 2 для прямого и общего билирубинов готовы для использования. Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом.
При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на бирке. Реагент 2 необходимо хранить в темном месте.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку, свободную от гемолиза. Образец желательно набрать у пациента с утра на голодный желудок. При работе с образцами рекомендуется придерживаться требований NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец должен набираться только в специально предназначенный для этого контейнер. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часов после забора крови.

Стабильность: до 3 дней при 2-8°C, в темном месте.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	нет
Универсальные контроли Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	нет
Универсальные контроли Уровень 2	AD932

Процедура определения:
Длина волны: λ 555 нм Температура: 15-25°C
Длина оптического пути: 1 см.

Общий билирубин	Бланк образца	Образец	Бланк Калибратора	Калибратор
Реагент 1	1.5 мл	1.5 мл	1.5 мл	1.5 мл
Реагент 2	----	50µл	----	50µл
Образец	100µл	100µл	----	----
Калибратор	----	----	100µл	100µл
Аккуратно смешайте реагент и образец. Измеряйте изменение оптической плотности через 5 минут (OD).

Прямой билирубин	Бланк образца	Образец	Бланк Калибратора	Калибратор
Реагент 1	1.5 мл	1.5 мл	1.5 мл	1.5 мл
Реагент 2	----	50µл	----	50µл
Образец	100µл	100µл	----	----
Калибратор	----	----	100µл	100µл
Аккуратно смешайте реагент и образец. Измеряйте изменение оптической плотности через 5 минут (OD).

Калибровка:

Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

1. Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
2. Производите профилактическое обслуживание или меняете неисправные детали фотометра.
3. Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.

Контроли должны подвергаться анализу:

1. Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
2. Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
3. В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

Прямой билирубин
От 0 до 3.4 µмоль/л (0 - 0.2 мг/дл)
Общий билирубин
В сыворотке	Ранний (µмоль/л)	Ранний (мг/дл)	Полный срок (µмоль/л)	Полный срок (мг/дл)
Кровь из пуповины От 0 до 1 дня 1 -2 дня 3 - 5 дня	< 34.2 < 137 < 205 < 274	< 2 мг/дл < 8 мг/дл < 12 мг/дл < 16 мг/дл	< 34.2 24 to 149 58 to 197 26 to 205	< 2 мг/дл 1.40 – 8.72 3.39 - 11.5 1.52 – 11.9
Взрослые 5 - 21 µмоль/л ( 0.3 – 1.23 мг/дл)

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: общий билирубин до 342 µмоль/л (20 мг/дл).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl. Результат соответственно увеличить в 2 раза.

Прямой билирубин до200 µмоль/л (11.6 мг/дл). Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl. Результат соответственно увеличить в 2 раза.

Точность:

Общий билирубин				Прямой билирубин
Внутрисерийная N = 20	Среднее значение (ед/л)	SD	% CV	Межсерийная N = 20	Среднее значение (ед/л)	SD	% CV
Уровень 1	26.3	0.470	1.79	Уровень 1	9.47	0.473	4.9
Уровень 2	119.4	2.97	2.49	Уровень 2	41.5	0.985	2.37

БИБЛИОГРАФИЯ:

1. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed. 30-54, 601-606 and 966.
2. Ws MI, Gerarde RW. Micrpchem 15 (1970) 231