Триглицериды

ТРИГЛИЦЕРИДЫ

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ЖИДКИЙ РЕАГЕНТ

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА:

Кат. №.	Количество	Реагент	Хранение
AD801T	10 x 18 мл 1 x 10 мл	ТРИГЛИЦЕРИДЫ ТРИГЛИЦЕРИДЫ - Стандарт	2-8°C
AD821T	4 x 250 мл 1 x 10 мл	ТРИГЛИЦЕРИДЫ ТРИГЛИЦЕРИДЫ - Стандарт Стандарт	2-8°C
AD841T	6 x 60 мл 1 x 10 мл	ТРИГЛИЦЕРИДЫ ТРИГЛИЦЕРИДЫ - Стандарт	2-8°C

ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ:

InVitro диагностике данный реагент применяется для определения триглицеридов в сыворотке и плазме на автоматических и полуавтоматических анализаторах.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ:

Триглицериды – это сложные эфиры глицерола с 3 цепочками жирных кислот. Они частично синтезируются в печени, а частично попадают с пищей. В первую очередь, показатели исследования триглицеридов служат зеркалом различных расстройств и липидного метаболизма в организме человека, а также наблюдается при заболевании диабетом, нефрозом и печеночной обструкции.

ПРИНЦИП МЕТОДА:

Принцип базируется на превращении триглицеридов липопротеинлипазы (LPL) в глицерол. Затем в результате реакции глицерола в присутствии глицеролкиназы (GK), ATФ и глицеролоксидазы (GPO) образуют гидроген пероксид. В результате реакции гидроген пероксида в присутствии аминофеназона (4-АА), чувствительного хромогена 4-хлорофенола и периоксидазы образуется красно-рыжый комплекс (хинонимин), количество которого пропорционально концентрации триглицеридов в образце пациента.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Реагенты можно использовать только профессионально для лабораторной диагностики. Внимательно прочитайте инструкцию по работе с реагентами. Отклонения от порядка выполнения процедуры могут изменить порядок выполнения анализа.

Цвет и вид компонентов:
Реагент 1: Непрозрачная жидкость.

Любые незначительные изменения цвета могут означать, что анализ, возможно, выполнен некорректно. В этом случае обратитесь к программе лабораторного контроля качества. В случае серьезных повреждений флакона и/или крышки, результатом чего стала утечка и/или загрязнение реагента, не используйте комплект и обратитесь к дистрибьютору.

Меры безопасности:
Внимание: Данные реагенты содержат азид натрия, поэтому придерживайтесь всех необходимых мер безопасности при работе с ними в лаборатории. Техническая информация безопасности материалов предоставляется по запросу.

Меры предосторожности при использовании:

1. Не используйте просроченные реагенты, дата пригодности указанна на флаконе.
2. Не замораживайте реагенты.
3. Не используйте реагенты для других целей, кроме тех, которые указаны в разделе «ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ»
4. Не меняйте крышки флаконов между собой, это может привести к загрязнению реагентов, что, впоследствии, приведет к неправильным результатам анализа.
5. Следуйте требованиям по утилизации продукта.

ОБОРУДОВАНИЕ:

Описание по использованию оборудования предоставляется по запросу.

СОСТАВ РЕАГЕНТОВ:

Компонент	Ингридиенты	Ингредиенты	Концентрация
Реагент 1		PIPES буфер рН 7.0	43.6 ммоль/л
		4-хлорофенол	5.45 ммоль/л
		Липопротеинлипаза	>1500 ед/л
		POD	>500 ед/л
		Глицеро-3-фосфатоксидаза	>3000 ед/л
		Глицерокиназа	>500 ед/л
		4-амино-антипирин	0.3 ммоль/л
		ATФ	1.65 ммоль/л
		Mg2+	4.66 ммоль/л
		Антикоагулянты и детергенты	-----
Стандарт		Триглицериды	60 мг/л

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ИХ СТАБИЛЬНОСТЬ:
Реагент готов к использованию

Перед использованием аккуратно перемешайте каждый флакон с реагентом. При правильном хранении набора, неоткрытые реагенты остаются стабильными до окончания даты пригодности, указанной на этикетке.

ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ):

Как образец используйте сыворотку или гепаринизированную/ЭДТА плазму. При работе с образцом рекомендуется придерживаться методики работы NCCLS (или похожих условий стандартизации). Образец необходимо набрать в соответствующий контейнер, предназначенный для этого образца. Сыворотка должна быть отделена от клеток сразу же после забора. Сыворотку/плазму необходимо отделить от клеток крови в течение 2 часов после забора.

Стабильность: от 5 до 7 дней при температуре 2-8°C.

МЕТОД КОНТРОЛЯ:

Необходимое оборудование (отсутствует в данном комплекте):

Описание	Кат. №	Описание	Кат. №
Калибратор	AD983	Фотометр	Нет
Универсальные контроли Уровень 1	AD922	Общее лабораторное оборудование	Нет
Универсальные контроли Уровень 2	AD932	Соляной раствор 0.9% г/л NaCl	Нет

Процедура определения:
Длина волны: λ 505нм
Температура: 37°C
Оптический путь: 1 см

	Бланк	Калибратор	Образец
Реагент 1	1000 μл	1000 μл	1000 μл
Образец	----	----	10 μл
Калибратор	----	10 μл	----
Аккуратно смешайте и инкубируйте при 37°C 5 мин. Считайте с бланка реагента значение оптической плотности (OD).

Калибровка:
Используя рекомендуемый калибратор, откалибруйте прибор:

1. Используете новый набор или меняете номер партии реагентов.
2. Производите профилактическое обслуживание или меняете необходимые детали фотометра.
3. Контроли качества за пределами допустимой нормы.

Контроль качества:
Все клинические лаборатории должны установить программу внутреннего контроля качества. Проводить проверку аппаратуры и реагентов при помощи рекомендуемого или схожего контроля. Оценка, полученная для контроля качества, должна соответствовать допустимым пределам производителя или должна быть установлена в соответствии с программой лабораторного контроля качества.
Контроли должны подвергаться анализу:

1. Когда получен предварительный отчет о результатах пациента.
2. Когда производится профилактическое облуживание фотометра.
3. В интервалах установленных программой лабораторного контроля качества.

РАСЧЕТЫ:

Концентрация триглицеридов = ODобразца/ODкалибратора х концентрацию калибратора.

(Коэффициент пересчета: ммоль/л = мг/дл х 0.0113).

*Фотометр должен быть пустым, как и бланк реагента.

ПРИМЕЧАНИЕ: В образце здорового пациента содержится приблизительно 10 мг/дл (0.11 ммоль/л) свободного глицерола. Чтобы получить правильное значение содержания свободного глицерола, вычтите это значение из концентрации триглицеридов.

ГРАНИЦЫ НОРМЫ:

NCEP-ATP II Классификация концентрации триглицеридов в сыворотке	мг/дл	ммоль/л
Нормальное	< 200	< 2.26
Пограничное	От 200 до 400	От 2.26 до 4.52
Высокое	От 400 до 1000	От 4.52 до 11.3
Очень высокое	> 1000	> 11.3

Каждая лаборатория должна установить свою собственную нормированную область значений. Полученные результаты всегда необходимо сравнивать с результатами анализов пациента и его историей болезни.

МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

Рабочие характеристики могут меняться в зависимости от используемой аппаратуры. Полученные данные в разных лабораториях могут отличаться от результатов, полученных в своей лаборатории.

Линейность: до 9.8 ммоль/л (867 мг/дл).
Для образцов с большей концентрацией, разведите: 1:1 с 0.9% NaCl и еще раз подвергните анализу. Результат увеличить в 2 раза.

Интерференция:
Желтуха: нарушение менее 11% при показателях билирубина (и фракций) до 150 µмоль/л.
Гемолиз: нарушение менее 10% при показателях гемоглобина до 5 г/л.

Чувствительность: самая низкая при 0.06 ммоль/л (5.31м г/дл).

Точность:

Внутрисерийная N = 20	Среднее значение (ммоль/л)	SD	% CV	Межсерийная N = 20	Среднее значение (ммоль/л)	SD	% CV
Уровень 1	1.71	0.05	3.08	Уровень 1	1.70	0.05	2.74
Уровень 2	2.86	0.07	2.43	Уровень 2	2.80	0.06	2.22

Метод сравнения:
Сравнение 50 образцов с использованием этих реагентов тргиглицеридов (y) и другими доступными реагентами (x), дали следующие результаты.

y =1.093x - 0.083

r = 0.999

Ранг образца: от 0.69 до 8.36 ммоль/л

БИБЛИОГРАФИЯ:

1. Allain CC. et. Al. Clin. Chem. 20 (1974) 470 - 475.
2. Werner M, Clin. Chem. 27,268 (1961).
3. Annoni G, Bottasso B.M.-Lab. J. Res. Lab. Med 9, 115 (1982).
4. Buccolo G, David M., Clin. Chem. 19, (1973) 476.
5. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fund. Of Clin. Chem. 5th ed. 30-54 and 462-494.
6. Tietz NW, ed Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, Pa: WB Saunders, 1995: 130-131.